Prekliinilises bioloogilises väljatöötamises kasutatakse ahvilisi, eriti makaake, sageli farmakokineetilistes, farmakodünaamilistes, toksikokineetilistes ja ohutusuuringutes. Loomade piiratud kättesaadavuse, kõrgete uuringukulude ja kasvava surve tõttu väljatöötamise ajakavade kiirendamiseks kaalutakse mõnikord pärast piisavat ravimivaba perioodi uuesti "pestud ahvide" taaskasutamist.
Kuid bioloogiliste ravimite puhul ei tähenda ravimi väljapesemine tingimata immunoloogilist lähtestamist. Ahvil ei pruugi olla mõõdetavat ravimijääki eelmisest uuringust, kuid tal võib siiski olla algtasemel ravimivastane -antikehade reaktiivsus. See reaktsioonivõime võib tuleneda eelnevast kokkupuutest mõne muu bioloogilise, immuunmälu, ristreaktiivsete antikehadega või looduslikult esinevate antikehade taustaga. Kui seda enne annustamist ei tuvastata, võib algtaseme ADA segada kokkupuute, farmakoloogia, ohutuse ja immunogeensuse andmete tõlgendamist.
Seega, kui uues prekliinilises uuringus kaalutakse välja uhutud{0}}ahve, tuleks loomade kvalifitseerimise protsessi osana kaasata ADA algtaseme sõeluuring. Eesmärk ei ole otseselt ennustada inimese immunogeensust, vaid parandada loomkatsete andmete usaldusväärsust ja tõlgendatavust.
Miks on algtaseme ADA oluline väljapestud{0}}ahvide puhul?
Väljapestud{0}}ahvid ei ole alati samaväärsed naiivsete loomadega. Varasem kokkupuude antikehade, sulandvalkude, konstrueeritud Fc-molekulide, tsütokiinide, PEGüleeritud valkude või muude bioloogiliste ainetega võib indutseerida antikehi, mis püsivad pärast esialgse ravimi eemaldamist. Need antikehad võivad uues testitavas artiklis ära tunda jagatud struktuurielemente, nagu Fc-piirkonnad, Fc-mutatsioonid, hingepiirkonnad, linkerid, glükaanid, PEG-fragmendid, karkassi domeenid või muud konstrueeritud järjestused.
Kui selline algtaseme ADA esineb enne uue uuringu esimest annust, võib tekkida mitmeid riske. Katseartikkel võib näidata ootamatult madalat kokkupuudet, kiiremat kliirensit, lühenenud poolväärtusaega, vähenenud farmakodünaamilist vastust või ebanormaalset individuaalset varieeruvust. Mõnel juhul võivad immuunkompleksid moodustuda ja kaasa aidata infusioonireaktsioonidele, komplemendi aktiveerimisele, tsütokiinide vabanemisele või muudele immuunsüsteemiga seotud leidudele.
See tekitab suure tõlgendamisprobleemi. Ilma algtaseme ADA teabeta võib olla raske kindlaks teha, kas ebanormaalne PK, PD või ohutusprofiil peegeldab uuritava artikli olemuslikke omadusi või looma immuunsüsteemi ajalugu.
Sel põhjusel tuleks ADA algtaseme sõeluuringut väljapestud{0}}ahvidel vaadelda kui prekliiniliste andmete-kvaliteedi mõõdikut. See aitab kindlaks teha, kas taaskasutatud loom on kavandatud uuringu jaoks sobiv ja kas saadud andmed nõuavad erilist tõlgendamist.
Soovitatav terminoloogia
Teadusliku täpsuse huvides tuleks terminit "-olemasolev ADA" kasutada selles kontekstis ettevaatlikult. Inimestel viitab olemasolev ADA tavaliselt antikehadele, mis esinevad enne kokkupuudet konkreetse terapeutilise ravimiga. Uhtunud-ahvidel võib algtaseme reaktsioonivõime olla põhjustatud hoopis varasemast eksperimentaalsest ravimiga kokkupuutest.
Sobivamate terminite hulka kuuluvad "ADA-reaktiivsus algtaseme", "ADA-eelne -annuse reaktsioonivõime" või "alustaseme anti-testi-antikehade reaktsioonivõime". Need terminid ei viita sellele, et antikehad on looduslikult esinevad, ja kajastavad paremini hindamise praktilist eesmärki.
Kui algtaseme ADA sõeluuring on kõige olulisem
Algtaseme ADA sõeluuring on eriti oluline, kui pöördelistes või tõlgendus{1}}tundlikes uuringutes kasutatakse väljapestud ahve. Nende hulka kuuluvad GLP toksikoloogilised uuringud, toksikokineetilised uuringud, ametlikud farmakokineetilised uuringud, kokkupuutehinnangud, ohutusmarginaali hinnangud ja uuringud, milles farmakodünaamilised biomarkerid on otsuste tegemisel kesksel kohal.
Vajadus on suurem ka keerukate või immunoloogiliselt aktiivsete struktuuridega bioloogiliste ravimite järele, nagu bispetsiifilised antikehad, multispetsiifilised antikehad, Fc-sulandvalgud, immuun-raku sidujad, tsütokiinil- põhinevad molekulid, PEGüülitud valgud, konstrueeritud Fc variandid ja molekulid, mis sisaldavad uudseid või volditud domeenisid.
Uurimuslike või mitte{0}}GLP-uuringute puhul võib sõelumisstrateegiat lihtsustada. Kuid isegi varajastes uuringutes tuleks enne-annustamist proove koguda ja säilitada. Kui hiljem ilmnevad ootamatu kokkupuute vähenemine, nõrk farmakoloogia või immuunsüsteemiga seotud-leiud, võivad need proovid toetada retrospektiivset uurimist.
Praktiline läbivaatamise ja otsustamise raamistik
Riskipõhist-raamistikku saab kasutada enne väljapestud-ahvide määramist uude bioloogilisse uuringusse.
Esiteks tuleks üle vaadata looma ajaloolised uuringudokumendid. Oluline teave hõlmab eelmist testiartiklit, molekulaarset vormingut, annuse taset, annustamisviisi, doseerimise kestust, viimast annustamiskuupäeva, väljapesuperioodi, eelnevat ADA olekut, eelnevat ravimiga kokkupuute profiili, infusioonireaktsioone, immuunsüsteemiga seotud leide ja taastumisandmeid.
Teiseks tuleks enne uue uuringu algust koguda doosieelne seerumi- või plasmaproov. Keerulise eelneva kokkupuute või lühikese väljapesemisintervalliga loomade puhul võib korduv proovide võtmine osutuda kasulikuks, et teha kindlaks, kas antikehade reaktiivsus on stabiilne, vähenev või kõikuv.
Kolmandaks tuleks algtaseme anti-test-artikli reaktsioonivõimet hinnata, kasutades ADA-testi, mis on sobiv-otstarbeks-. Analüüs ei pea alati olema täielikult valideeritud kliiniliseks immunogeensuse testimiseks vajalikul tasemel, kuid see peaks sobima loomade valikuks ja andmete tõlgendamiseks. Vähemalt peaks see aitama eristada tõenäolisi test-artikli-spetsiifilisi signaale mittespetsiifilisest taustast.
Neljandaks tuleks positiivsed loomad liigitada riskitaseme järgi. Madal-tase või piiripealne reaktsioonivõime võib olla mõnes uurimiskeskkonnas vastuvõetav, eriti kui loomad on rühmade vahel tasakaalus. Mõõduka reaktsioonivõimega tuleb käsitseda ettevaatlikult ja tõlgendada koos farmakokineetika, PD ja ohutusandmetega. Tugev algtaseme reaktsioonivõime, kinnitatud spetsiifilisus, kõrge tiiter või neutraliseeriv potentsiaal peaksid looma üldiselt välistama kesksetest uuringutest või uuringutest, mis sõltuvad suuresti kokkupuute tõlgendamisest.
Viiendaks tuleks ADA algtulemused integreerida{0}}uuringu vaatlustega. Algtaseme ADA-positiivset looma, kellel ilmneb hiljem kiire ravimi kliirens, madal kokkupuude, ebanormaalne PD vastus või immuunsüsteemiga seotud ohutusalased tulemused, tuleks tõlgendada teisiti kui algtaseme -negatiivset looma, kellel on sarnased tähelepanekud.
Kuidas kasutada tulemusi uuringu kavandamisel
Algtaseme ADA sõeluuringut ei tohiks käsitleda lihtsa jah-või-ei-harjutusena. Selle väärtus seisneb loomade parema valiku, rühmade määramise ja andmete tõlgendamise toetamises.
Keskse GLP toksikoloogia või võtme jaoksTK õpingud, tuleks üldiselt vältida loomi, kellel on tugev algtaseme ADA reaktiivsus. Kui tuleb kasutada väljapestud ahve, peab põhjendus olema teaduslikult põhjendatud ning ADA algseisund tuleb uuringufailis ja lõpparuandes selgelt dokumenteerida.
Uurimuslike PK/PD uuringute jaoks võib kasutada madala-riskiga loomi, samas kui mõõduka-riskiga loomi võib reserveerida varukoopiatena või jaotada rühmade vahel ühtlaselt. Kõrge -riskiga loomi ei tohiks määrata kriitilistesse annuste rühmadesse, välja arvatud juhul, kui uuring on spetsiaalselt kavandatud ADA algtaseme mõju hindamiseks.
Organisatsioonidele, kes kasutavad ahve regulaarselt, on tungivalt soovitatav luua sisemine loomade immunoloogia andmebaas. See andmebaas peaks hõlmama iga looma eelnevat bioloogilist kokkupuudet, ADA ajalugu, väljapesemise intervalli, algtaseme reaktsioonivõimet uutele katseartiklitele, PKkäitumine, ohutusvaatlused ja taaskasutamise tulemused. Aja jooksul võivad sellised andmed toetada rohkem tõenditel{1} põhinevat loomade valikut ja vähendada ebakindlust prekliiniliste uuringute tõlgendamisel.
Peamised piirangud
Algtaseme ADA sõeluuringul uhutud{0}}ahvidel on selge väärtus, kuid sellel on piirangud. Monkey ADA tulemusi ei saa kasutada inimese immunogeensuse riski hindamise otsese asendajana. Liikide erinevused immuunajaloos, antikehade repertuaaris, Fc retseptori bioloogias, komplemendi aktiivsuses ja keskkonnaga kokkupuutes piiravad otsest translatsiooni inimestele.
Lisaks ei tähenda algtaseme ADA positiivsus alati seda, et loom ei sobi. Mõnel madalal-tasemel või mitte-neutraliseerival signaalil võib olla piiratud mõju uuringu lõpp-punktidele. Ja vastupidi, negatiivne algtulemus ei välista täielikult -tekkinud ADA ravi võimalust uuringu ajal.
Tulemusi võivad mõjutada ka analüüsi formaat, reaktiivi kvaliteet, lõikepunkti strateegia, ravimi taluvus, sihtmärgi interferents ja maatriksiefektid. Sel põhjusel tuleks ADA algandmeid tõlgendada alati koos ravimi kontsentratsiooni, farmakodünaamilise vastuse, kliiniliste vaatluste, tsütokiinide, komplemendi markerite, patoloogia leidude ja loomade varasema ajalooga.
Järeldus
Väljapestud{0}}ahvide kasutamine prekliinilistes bioloogilistes uuringutes võib olla teaduslikult ja eetiliselt mõistlik, kui loomade ajalugu, ravimite kliirens ja immunoloogiline taust on korralikult kontrollitud. Siiski ei piisa ainult ravimi väljapesemisest. Bioloogiliste ravimite puhul võib ADA algtaseme reaktsioonivõime püsida ja mõjutada kokkupuudet, farmakoloogiat, ohutussignaale ja immunogeensuse tõlgendamist.
Eesmärgile sobiv-eesmärgile-sobiv ADA sõelumisstrateegia annab praktilise võimaluse kvalifitseerida väljapestud-ahvid enne taaskasutamist. See aitab tuvastada kõrge-riskiga loomi, toetab tasakaalustatud rühmade määramist, parandab andmete tõlgendamist ja vähendab eksitavate farmakokineetika, PD või ohutusjärelduste tegemise võimalust.
Kõige sobivam lähenemine ei ole mitte kõiki väljapestud{0}}ahve tagasi lükata, vaid kasutada neid struktureeritud tõenduspõhise-riskiraamistiku alusel. Algtaseme ADA sõeluuring peaks seetõttu muutuma standardse uuringueelse-hinnangu osaks, kui bioloogiliste ravimite väljatöötamisel kaalutakse välja uhutud-ahve.
Võtke ühendust Prisys Biotechiga
KKK
K: Mis on prekliinilistes uuringutes väljapestud{0}}ahvid?
V: Väljapestud-(mittenaiivsed) ahvid on loomad, keda on varem kasutatud teises uuringus ja mida hiljem kaaluti taaskasutamiseks pärast piisavat taastumist või ravimi-vaba perioodi. Kuigi eelmine ravim ei pruugi olla enam tuvastatav, võib loomal siiski olla immuunmälu või jääkantikehade reaktiivsus.
K: Miks on ADA algtaseme sõelumine oluline enne väljapestud{0}}ahvide taaskasutamist?
V: Algtaseme ADA võib siduda uue testartikli enne doseerimise algust. See võib mõjutada ravimi ekspositsiooni, kliirensit, farmakodünaamilist vastust, ohutusandmeid ja immunogeensuse tõlgendamist. Sõeluuringud aitavad kindlaks teha, kas loom on uuringu jaoks sobiv.
K: Kas kõik algtaseme ADA{0}}positiivsed ahvid tuleks välistada?
V: Ei. Väljajätmine peaks sõltuma tugevusest, spetsiifilisusest, tiitrist, neutraliseerimispotentsiaalist, uuringu eesmärgist ja eeldatavast mõjust andmete tõlgendamisele. Tugevate või kinnitatud algtaseme ADA-positiivseid loomi tuleks pöördelistes uuringutes üldiselt vältida, samas kui madala-taseme signaalid võivad olla uuritavates uuringutes hallatavad.
K: Kas ahvide algtaseme ADA sõeluuring võib ennustada inimese immunogeensust?
V: Ei. Seda ei tohiks kasutada inimese immunogeensuse otsese ennustajana. Selle peamine eesmärk on parandada prekliiniliste loomade andmete kvaliteeti ja tõlgendatavust.
